创建荧光样品光学切片 – 无杂散光。利用结构照明,您将获得只包含焦平面信号的图像:Apotome.2 能自动识别物镜放大倍数,并将与相应放大倍数匹配的栅格移至光路中。系统在无时间延迟的情况下从不同栅格位置的三幅图像中计算出光学切片图像。它是一种有效的消除非焦平面杂散光的方法,同样适用于比较厚的样品。系统操作简便。卓越的光学切片 – 让您获得出色分辨率的高对比度图像。
因为不同的应用需要使用不同物镜, 所以您需要一个能为每种应用都提供出色分辨率的系统 。Apotome.2 自动选择与物镜匹配的栅格 ,其中共有三种不同栅格供选择 。通过 1 个 Rayleigh 单位来定义光学切片的厚度,以获取高品质图像。
从传统 HBO 光源到可随意调节的金属卤化物灯 HXP 120 C 和 Colibri.2 LED 光源,柔和照射样品表面:Apotome.2 可选择任意一种所需光源。此外,该成像系统还适用各种荧光染料。无论是 DAPI、FITC、Rhodamin、Cy5 或活体染料,如 GFP 和 mRFP,一切取决于您,任何染料都不受技术上的制约。使用时仅需更换滤色片,系统便会自动将栅格移至正确位置。从 DAPI 到 Cy5,您可获得优质的多通道荧光光学切片图像。
当光学切片厚度约 1 个 Rayleigh单位,表明图片具有良好信噪比、高轴向分辨率。相比于传统荧光显微镜,Apotome.2 提高了 Z 轴分辨率:即便是厚样本也能通过三维渲染获取高质量的光学切片。
Image courtesy ofChristophe Leterrier, CRN2M/CNRS-AMU, Marseille.
那蔡司ApoTome.2结构光照明系统能为您的科研带来哪些帮助呢?
它通过栅格的移动将非焦平面模糊的信息进行去除,
★可有效地改善图像质量和提高空间分辨率及对比度
Courtesy of E. Fuchs & S.Bauch, DPZ Göttingen, Germany
▲斑马鱼3D层扫。左侧为使用宽场显微镜的图片,右侧为使用ApoTome.2图片
★ 操作简便,ApoTome.2栅格自动匹配不同的物镜和荧光滤片,可轻松实现宽场与ApoTome.2切换
★ 具有较强的灵活性,可任意搭载正置、倒置和体式显微镜,以满足不同实验需求
除此之外,在神经生物学、干细胞、细胞生物学乃至癌症研究、转化医学、免疫学,这些改变生物生存乃至人类生活的重要领域都有蔡司ApoTome.2活跃的身影。
精选:2014年发表于nature COMMUNICATIONS一篇利用ApoTome成像技术研究EXOSC8蛋白对于斑马鱼神经纤维髓鞘化的重要性(VeronikaBoczonadi.et.al, 2014)的文章
▲EXOSC8下调对斑马鱼脊髓形态和神经纤维的影响。
红色标记为MBP(myelin basic protein),绿色标记为acetylated tubulin(乙酰化微管蛋白)
前两行:对照组与EXOSC8下调组斑马鱼尾部结构对比,发现EXOSC8下调导致脊髓弯曲神经纤维变短或消失;
后两行:斑马鱼侧线对比,EXOSC8下调导致侧线神经纤维的缺失。
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