Tissue-Tek®Polar®冰冻切片机的使用心得

王馨梅，李星奇，王德田

（北京协和医院 病理科）

【摘要】目的：探讨日本樱花Tissue-Tek®Polar®冰冻切片机的使用规范，以保证冰冻切片的质量。方法：通过对日本樱花冰冻切片机的实践操作，总结该类型切片机的操作技术要点。结果：正确的使用切片机，不仅可以节省切片所需时间，还可以提高切片的质量。结论：正确使用是保证病理冰冻切片机更好工作的基础。

【关键词】冰冻切片机；正确使用；心得

冰冻切片机是制作冰冻切片的一种先进设备。随着临床外科学的发展．需要冰冻切片进行快速诊断的病例不断增加，冰冻切片机的使用频率随之增高，对冰冻切片机的要求越来越高，随之新的产品不断涌现。现将我科使用的Tissue-Tek®Polar®冰冻切片机中一些经验体会做一个简单介绍，以求规范其使用。

1.方法

1.1病理工作人员操作前应戴口罩和防护手套，疑有囊液喷溅的标本，还应该佩戴防护目镜。

1.2检查冰冻切片机是否处于正常工作状态。将切片刀的角度调整为常用的5。根据不同标本调整适当的温度和切片厚度。

1.3切片前把组织托盘和适当数量的刀片放于冷台上备用。

1.4手术室送检的新鲜标本，不经任何处理，切成1.5 cm×1.5cm×0.2 cm大小的组织块，用干净纱布吸干组织块表面血水。将组织置于包埋模中，铺平，滴入足够的包埋剂，再加上冻托，迅速冷冻。

1.5用切片夹头把冻好的组织托盘进行固定，用快进键将冻好的组织块移进切口，按修片键进行修片，待组织面充分暴露后，放下防卷板切片，根据不同的组织调整切片的厚度和均匀摇片的速度，将切好的组织片粘贴在载玻片上。

1.6 95％乙醇固定30 s，取出后水洗，切片放入苏木素染液中2min，水洗后盐酸分化，氨水返蓝，伊红染色，脱水透明后用中性树胶封片。

2.结果

我科自按照以上规范的操作技术使用Tissue-Tek®Polar®冰冻切片机以来，冰冻切片速度和切片质量明显提高，可在10余分钟内完成制片全过程，保证了诊断的及时性。所制切片完整，无刀痕、皱襞、空洞、冰晶，厚薄均匀，细胞无重叠，颜色对比协调，染色均匀、对比清晰，细胞核蓝色，胞质、纤维和肌肉等呈深浅不同的红色。很少出现冰晶干扰，很好地完成了日常冰冻切片任务．满足了临床外科手术的需要．为患者的正确治疗提供了及时可靠的报告。

3.体会

准确的诊断是以高质量的冷冻切片为前提的，因此要求技术人员在冷冻切片制作过程中除了要熟练掌握冷冻切片的特点外，还要充分掌握和发挥好机器的各项性能和特点。

3.1 脂肪切片 新款冰冻切片机Tissue-Tek®Polar®，对于冷冻切片当中较难解决的脂肪切片问题，做了很大的技术提升。由于机器采用了卓越的刚性设计，可对样品头、刀架周边进行适当的温度调节，而且温度调节迅速，可在数秒内达到设定的温度。即使在对内脏器官进行切片后，也能进行脂肪切片。另外如果配合Histo-Tek®PINO®即紧凑型超低温冷冻器，对于冷冻脂肪组织切片效果更佳。此仪器可将组织以-75°的温度迅速冻结（大约＜1min），却不会造成包埋块的硬化和破裂，如此不仅冷冻迅速，免去了使用干冰或液氮长时间和繁琐步骤，而且有效减少了冰晶的产生，亦可将脂肪组织冷冻透彻，切出的切片比较完整，保持了组织的完整形态，镜下观察较为满意。

3.2 坚硬组织切片厚薄均匀 样品头和刀架较过去有很强的硬度，因此对于低温下坚硬的组织，也较好地避免了接触震动而产生的厚度不均匀的现象。

3.3 石蜡式包埋 超低温冷冻器的包埋方式采用类似石蜡包埋的形式，增加了一种包埋模具，将组织置于包埋模中，铺平，滴入足够的包埋剂，再加上冻托，迅速冷冻，此时包埋面平整而且暴露完整，无需过多的修片就可以找到切面，避免了病变组织的修片损失。此种冷冻包埋对于穿刺、切缘等细小组织的制片的完整性有了很大的帮助。但此种包埋冷冻方式，对于包埋剂的消耗比较多而且对于加入的量要掌握恰当。过多，不容易将冻块取下；太少，修片时容易使冻块与冻托脱离。

3.4 防卷板及伸展器 切片时，放下并调整防卷板上缘与刀刃在同一水平线上，配合适宜的切片力度和转速，在负压吸引装置的正确使用下使组织切片从防卷板下平顺滑出，就能得到一张很好的冰冻切片。Tissue-Tek®Polar®切片机不仅配有方便调节的防卷板，还在样品头的上方配有一个金属的切片伸展器，切片时可以更有效的防止切片卷曲。防卷板和伸展器的正确使用关系到切片能否很好的展开，因此熟练调整并正确使用防卷板和伸展器需要得到设备使用者的充分重视。

3.5 安全方面 在防止感染和安全方面Tissue-Tek®Polar®切片机也有一些新型的设计。如臭氧处理系统和吸屑功能，抑制污染气体向箱体外扩散，从而达到对操作人员的保护。

冷冻切片技术是较难掌握的病理实验技术之一，通过长时间的使用，我们认为此型冰冻切片机质量可靠、性能稳定，能够做出满意的切片。

参考文献

【1】禹乐，郭以河，林明珠，戴太监。日本樱花Tissue-tekCryo3冰冻切片机的正确使用和保养体会【J】。医疗装备，2010,23（1）：64-65。

【2】王恒树，史淑芬，崔爱荣，马毓梅。MIcROM HM505E型恒冷冰冻切片机的使用体会【J】。诊断病理学杂志，2014,21（1）：63。