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水在组织学实验中的应用
来源: | 作者:xinrui2018 | 发布时间: 2018-03-30 | 2932 次浏览 | 分享到:

组织学是病理科研究的重要工具。它在癌症及其他疾病的诊断监测和病原体的检测鉴定中发挥十分的关键作用。


7月27日，上海交通大学医学院附属仁济医院消化科的房静远教授团队与美国密西根大学邹伟平教授合作在Cell杂志发表了题为“Fusobacterium nucleatum Promotes Chemoresistance to Colorectal Cancer by Modulating Autophagy”的研究论文（DOI:10.1016/j.cell.2017.07.008）。


该研究通过整合基因组学、组织学、生物信息学和临床调查等手段实现了证明核梭杆菌促进结直肠癌对化疗的耐受是通过调节自噬实现这一历史性突破。


该研究为临床上评估结直肠癌治疗后的复发风险和进一步加强联合治疗提供了非常广阔和重要的应用前景。



水是许多组织学试剂和缓冲液的重要组成成分，用于漂洗和漂浮浴。质量差的水可能会产生人造物而影响染色结果，也会影响颜色密度、特异性或降低化学染料的稳定性，自来水可能会因季节不同而不同（pH、离子、有机物），这也可能会对实验结果的重现性产生影响。


无论是去离子水和蒸馏水、购买的瓶装水还是从自来水生产，可能在质量上有差异，并会随时间而变化。而现如今，组织学工作者可以依靠多元化的水纯化技术得到稳定可靠的试剂水。

在本研究中，我们测试了应用反渗透、电流去离子和紫外技术的Elix®系统纯化水是否可以用于组织学染色实验。

实验步骤


GMS染色

使用商业化的GMS试剂盒。 在第一个实验中，分别用蒸馏水，去离子水，Elix®系统纯化水制备甲胺硝酸银溶液。 在第二个实验中，Elix®水中掺入一些常见的污染物（金属：1 mg / L硫酸铬钾，硫酸铜或硫酸镍; 有机分子：1mg / L腐殖酸; 10ppm硅酸钠; 细菌副产物：1000 EU / mL内毒素）。


H＆E染色

H＆E染色过程中几乎总是使用自来水用于苏木精前后的冲洗、分化和蓝染步骤。 在本研究中，所有的漂洗步骤以及蓝染色溶液的制备完全用自来水或来自Elix®系统的纯化水。


结果与讨论


GMS染色

众所周知，一些特殊染色技术如银染对水中污染物非常敏感，对肺组织中肺囊虫的GMS染色就是如此。 当使用来自Elix®系统纯化水用于试剂的制备，没有任何背景噪音，能获得可靠的结果（Figure 1.）。 用Elix®系统纯化水可以代替蒸馏水或去离子水用于GMS染色。



Figure 2. 说明了水中杂质如金属、有机分子（腐殖酸，主要来源于自来水）、二氧化硅和细菌副产物（内毒素）对GMS染色的影响。 为了获得最佳效果，因此也建议使用不含这些杂质的纯净水。



H＆E染色

H＆E染色（Hematoxylin and Eosin Stain）可能是组织学实验中使用最广泛的染色方法。自来水由于其pH值的波动，甚至可能含有可能导致苏木精褪色的物质（铁、硫或氯）而无法得到稳定的蓝色。

Elix®系统纯化水代替所有漂洗步骤中的自来水，并且在制备蓝染试剂时使用，可以得到同等的染色特异性和颜色（Figure 3.）。



现代生物医学实验室使用的技术依靠高品质的试剂，以获得可靠和可重复的结果。如果水中含有干扰组织学实验的污染物：

  • 离子和金属，可能会影响pH值并与染料相互作用;

  • 有机物和内毒素，可能影响染色过程;

  • 细菌和颗粒，可能沉积在载片上并产生人造物。

而结合几种水纯化技术（反渗透，电流去离子和紫外线）产生的纯水可以提供一致可靠的质量，适用于广泛的染色实验，而且可以在组织学中替代蒸馏水和去离子水，提供更高质量更可靠的结果，同时降低水中的污染物造成的风险。


Elix®水纯化系统可以提供在线水质监测以及嵌入式e-solution5数据管理工具，确保数据的可靠性和可追溯性，这是寻求ISO® 15189：2012. 等标准认证的实验室的最佳选择。



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